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截形十二卷的组织培养和快速繁殖——2002.9.10 |
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作者: 孙
涛(天津医科大学基础医学院 ) 李德森(南开大学生命科学院,教授) 1植物名称 截形十二卷(Haworthia truncata),俗称玉扇。 2材料类别 成年玉扇的春生花茎(其中大部分花蕾已出现但尚未开放)。供试植株来源于日本カクタヌ专门家联盟。 3培养条件 (1)启动培养基:M S + 6BA 3 mg·L-1( 单位下同)+ NAA 0.2 ;(2)分化培养基:M S + KT 3 + NAA 0.2 ;(3)增殖培养基: M S + KT 1.5 + NAA 0.1 ;(4)复壮与生根培养基:M S + NAA 0.1 。 以上培养基均加入3%蔗糖,0.7%琼脂,pH6.0。培养的温度为(25±2)℃,光照8 h·d-1,光照度为2000 lx。 4生长与分化情况 4.1无菌材料的获得 将取下的材料经流水冲洗5 min,1%新洁尔灭浸洗10min,无菌水冲洗3次,2%NaOCl溶液8 min,无菌水再冲洗4~5次。将消毒的材料置于无菌滤纸上,剪成1 cm左右的小段,即成外植体。 4.2启动培养 将玉扇的外植体接入启动培养基(1),20 d后花子房部形成黄绿色疏松的小球状愈伤组织,增殖速度不快,未见分化。 4.3分化培养 将上述培养物转入分化培养基(2)中,30 d后愈伤组织转绿并开始分化,15 d后能形成大量丛生芽。 4.4芽的增殖 将上述培养物转入增殖培养基(3)。大约20 d后各瓶都可以形成丛生苗。将苗丛分割后增殖速度较适中,芽基部无愈伤组织或有极少愈伤组织形成,植株易分离,同时大约50%的苗有2~3条须根生成。增殖培养在转瓶时切忌将培养物分离得太多,这样会延长继代培养的缓冲期。继代时间以20 d左右一次较好,此时苗的繁殖系数可达到3~4倍,这样得到的苗生长情况较好,出瓶容易。 4.5壮苗与生根 在增殖培养基(3)上得到的苗有些已生根,可剪取有根大苗直接出瓶。但最好先转入生根培养基(4)中 培养 1~2个月左右,可使苗较快的生长。在转入生根培养基后,需要增大光照强度到3000 lx,最好使用散射阳光,生根率90%以上。 4.6移栽 采用蛭石:珍珠岩=2:1的混合基质,经高压灭菌后装入苗钵,距顶端大约5 cm。将开口炼苗2 d的出瓶苗均匀插入基质中,用家用保鲜膜保湿。用低浓度的多菌灵溶液浇灌,逐渐见光。经试验发现用散射日光代替荧光可提高成活率到98%以上,其中不经生根的苗成活缓冲期很长(4~6周),而经生根的苗缓冲期仅2周,便可见生长。经日光灯照射的生根苗明显不如用散射光培养的苗,无论长势还是缓冲期的长短,前者都逊色于后者。 5 意义与进展 截形十二卷是百合科蛇尾兰属的小型肉质植物,原产南非开普省。其形态与一般蛇尾兰属种类的差异很大,其变异类型很多,是植物园和园艺植物爱好者喜欢收集的珍贵品种。其外形精巧美观,很适于家庭养护,但由于繁殖率很低,故而难于普及。蛇尾兰属植物大多使用分株和种子繁殖,采用组织培养方法可能是解决截形十二卷繁殖与普及的有效途径之一,同时其组培的成功对该物种及其园艺品种的种质保存也有一定的参考价值。少数蛇尾兰属植物已组培成功,而截形十二卷的组培未见报道。 |