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作者: 孙
涛(天津医科大学基础医学院 ) 李德森(南开大学生命科学院,教授)
条纹十二卷(Haworthia fasciata)是百合科十二卷属的植物,原产南非开普省。是极具观赏价值的小型植物,色彩淡雅
,是大众化的多肉植物。由于以往主要通过分株法来繁殖,繁殖系数低。组织培养法是快速繁殖十二卷属植物的有效途径。另外,据文献记载十二卷属植物大都使用花序作为外植体,我们主要采用幼芽和嫩叶作外植体。
1.材料与方法:
1.1材料 条纹十二卷茎根部幼芽
1.2培养条件 以MS为基本培养基。
启动培养和诱导愈伤组织培养基: A:MS+6BA 3mg/l(下同)+VitaminC 200
芽分化及增殖培养基: B:MS+6BA 3+NAA 0.2+Vc200 C:MS+6BA 2+NAA 0.2+Vc200
根分化及增殖培养基: D:MS+2,4-D 1
复壮与生根培养基: E:MS+NAA 1
以上培养基均含蔗糖3%,琼脂7‰, pH=6.0.
培养温度 25±1℃ ,光照 8h/d , 光强度 2000lx.
1.3培养方法
从盆栽条纹十二卷母株茎根部切取生有4-5片幼叶的腋芽。流水冲洗5min,0.2%新洁尔
灭 浸泡30min,流水冲洗10min(这种方法比较节约水源,且污染率很低)。将材料至于超净台上用
0.1%HgCl2消毒8min,无菌水冲洗10次,无菌滤纸吸干水份。用解剖刀切取芽部分,并将切下的幼叶分 割成 0.5cm2
的小块儿。接种到培养基A中培养。
2.实验结果:
2.1 芽培养
条纹十二卷的芽在培养及A上迅速膨大并生长,大约20d后,将伸长的芽切割成3-4部分
, 接种于培养基B中。再过一星期在各芽基部都有一团幼芽萌生(约5-10个)。
2.2愈伤组织及芽诱导
幼叶截段经在A中培养约2个星期后,伤口表面有一层无色透明的愈伤组织产生。该愈伤组织经20天的培养并不见增殖而是从上面长出2-3个小芽,将芽切下转入B中后形成一团小苗。
2.3根诱导及其转化
将幼叶截段放入D中培养一个月,在伤口处形成许多白色球状根系并不断增多。将这些
根转入A中培养约一星期,根系转绿并有愈伤组织生出,在转入C中二星期后有球状胚体产生,有些 胚体开始长出幼叶。
2.4继代增殖与快速繁殖
将上述得到的小苗丛或球状胚粗略分割,接于C中即可大量增殖,平均每两周增殖一倍。目前,我们
所用的一个芽作外殖体,两个月后已经得到20多瓶继代植株(每瓶约30株左右)。
2.5壮苗生根 将大苗接种于培养基E中,加强光照到10h/d,一星期后生根,再培养约一星期便可移栽。
2.6移栽 在出瓶前打开瓶口,炼苗两天。将有根的苗洗去培养基移于蛭石+珍珠岩的无菌基质中,保持湿度,成活率高于90%.
(本文在中国科学院植物研究所、中国植物学会主办,第2001-5期《植物杂志》上发表。编辑:林月惠。)
(欣赏十二卷属植物之一、之二、玉扇锦、寿锦、琉璃
殿锦)
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